走进尊龙凯时
NEWS尊龙凯时草莓黄单胞菌PCR试剂盒
来源:董宝烟 日期:2025-07-14### 产品及特点
本尊龙凯时检测试剂盒是基于探针法荧光定量PCR原理研发的,具备以下特点:
1. 即开即用,用户仅需提供样品DNA模板。
2. 引物及其他组分经过优化,具有高灵敏度。
3. 提供阳性对照,有助于区分假阴性样品。
4. 特异性高,引物设计基于中间普雷沃菌DNA序列的高度保守区,避免与其他生物样本的DNA发生交叉反应。
5. 同时适用于定性和定量检测,定量检测的线性范围至少覆盖5个数量级。
6. 产品量足够支持50次20μL的探针法荧光定量PCR反应。
7. 本产品仅限于科研使用。
### 使用方法
1. **DNA提取(样本制备区)**:选择合适的方法提取纯化样品DNA,本试剂盒与市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。
2. **稀释标准曲线样品(样本制备区)**:为了避免污染样品或其他试剂,阳性对照的稀释操作需在独立区域进行。
1. 标记6个离心管,分别编号为2至7。
2. 在每个管中加入45μL DEPC-H2O。
3. 在7号管中加入5μL 1×10E8拷贝/μL的阳性对照,充分震荡1分钟,获得1×10E7拷贝/μL的标准曲线样品;放冰待用。
4. 按此步骤依次稀释至5号管,直到得到6个不同稀释度的标准曲线样品;放冰待用。
如果不需要制作标准曲线,可将阳性对照稀释至1×10E5拷贝/μL。
3. **试剂配制(试剂准备区)**:若有N个待检样品,准备N+2个qPCR管(N个待检样品+1个阴性对照+6个阳性对照),按照说明书中提供的详细成分将各PCR管转移至样本准备区。
4. **添加模板(模板添加区)**:依次向qPCR管中加入2μL模板,顺序为阴性对照(DEPC-H2O)、待测样品模板、婴儿利什曼虫qPCR阳性对照,离心30秒后,立即进行扩增反应。
5. **扩增反应(扩增及产物分析区)**:将PCR管置于PCR扩增仪器样品槽中,按照说明书中的扩增程序进行。
### 结果分析
1. 若制作标准曲线,则以阳性对照浓度的log值为横轴,Ct值为纵轴绘制标准曲线,进而推算待测样品DNA浓度的log值。
2. 若未制作标准曲线,根据以下标准判定结果:
- 阳性对照结果:Ct值<30,表现出明显的指数增长,呈典型的S型曲线。
- 阴性对照结果:Ct值为38或无Ct值,没有明显的指数增长期和平台期。
- 样本检测结果:Ct值<35,明显指数增长,则样本中检测出婴儿利什曼虫,结果为阳性;Ct值为38或无Ct值则为阴性;Ct值在35-38范围内需复检,若重复结果仍在此范围且显著增长,则判定为阳性,否则为阴性。
### 运输及保存
请低温运输,保存于-20℃,保存期限为一年。阳性对照需单独存放,避免污染其他试剂。尊龙凯时为您提供高品质的检测试剂,助力您的科研进步。
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